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Paratuberculosis: Nuevas Herramientas de Caracterización Aplicadas al Mycobacterium

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La paratuberculosis es una enfermedad crónica producida por una bacteria que afecta al aparato digestivo de rumiantes domésticos principalmente. La infección puede presentarse también en otras especies animales y ha sido relacionada en los últimos años con la enfermedad de Crohn en humanos.

Un trabajo de investigación sobre esta patología acaba de ser premiada en la ciudad de León (España) como la mejor tesis en Sanidad animal, la autora del trabajo es Elena Castellanos Rizaldos de la Facultad de Veterinaria de la Universidad de León.

En la tesis se presenta el desarrollo y aplicación de nuevas herramientas de caracterización molecular rápidas aplicadas a Mycobacterium avium paratuberculosis, la bacteria causante de la enfermedad, que permiten la clasificación rápida y subtipificación de aislados, así como su diferenciación de otros miembros del complejo Mycobacterium avium. Empleando estas metodologías se ha identificado por primera vez una variedad de cepas del tipo II de con una mutación natural que afecta a genes directamente relacionados con la virulencia del microorganismo.

El Estudio

La paratuberculosis es una enfermedad crónica granulomatosa que afecta al aparato digestivo de rumiantes domésticos principalmente, aunque la infección puede presentarse además en otras especies. El agente etiológico es Mycobacterium avium subespecie paratuberculosis (M. a. paratuberculosis), miembro del género Mycobacterium.

Las técnicas de electroforesis en campo pulsado (PFGE) y el análisis de los polimorfismos de longitud de los fragmentos de restricción y posterior hibridación con sondas específicas para IS900 (IS900-RFLP) han facilitado la división de las cepas de M. a. paratuberculosis en tres tipos; tipo I (también denominado ovino), II (bovino) y III (intermedio). En ocasiones, la caracterización molecular de algunos aislados y en especial los de crecimiento más lento (tipos I y III) no puede ser realizado mediante estas técnicas debido a los requerimientos de ADN necesarios.

La tesis Caracterización molecular de aislados de M. a. paratuberculosis. Mapa epidemiológico en España presenta el desarrollo y aplicación de nuevas herramientas de caracterización molecular rápidas aplicadas a M. a. paratuberculosis. Entre estas técnicas destaca la PCR y posterior secuenciación de los genes girasa A, girasa B, inh-A y secuencia de inserción IS900 que presentaron polimorfismos de nucleótido único específicos de cada tipo (I, II y III).

Por otro lado, la técnica de hibridación genómica comparada mediante microarray evidenció diferencias genéticas entre los tres tipos y permitió la puesta a punto de técnicas de PCR dirigidas a estas regiones genómicas. Otra técnica desarrollada durante el transcurso de esta tesis fue la de PCR a tiempo real y posterior análisis de las curvas de disociación de alta resolución que permitió la clasificación rápida de los aislados de M. a. paratuberculosis y su diferenciación de otros miembros del complejo Mycobacterium avium (MAC).

La necesidad de trazar los diferentes brotes de paratuberculosis presentes en las diferentes regiones geográficas, hacía imprescindible la puesta a punto de una técnica capaz de sub-tipificar dentro de las cepas de un mismo tipo. Por este motivo, y como complemento a los anteriores trabajos realizamos un análisis de diferentes loci con estructura de unidades repetitivas intergénicas dispersas de micobacterias (MIRU) y secuencias de ADN repetidas en forma de tándem (VNTR). Además, también se aplica esta técnica por primera vez en España para la subtipificación de aislados de Mycobacterium avium subespecies avium obtenidos de aves rapaces en libertad.

Finalmente, la puesta a punto de todas estas metodologías derivó en la identificación y caracterización molecular de una variedad de cepas del tipo II de M. a. paratuberculosis. Estas cepas presentaban una delección de 16 Kb en operones directamente relacionados con la virulencia de este microorganismo y constituían el primer grupo de cepas mutantes naturales para estos genes dentro del complejo MAC.

 

Fuente: León

 

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Girolando, la mejor alternativa para la producción lechera en climas cálidos

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Con una producción promedio de 5.000 litros de leche durante 305 días bajo el calor del clima tropical, estas terneras presentan una mayor resistencia y adaptación al entorno, lo que aumenta sus tasas de supervivencia. Estas cualidades las destacan en un país donde la cría de terneras enfrenta tasas de mortalidad de hasta el 25 %. Las terneras Girolando pueden producir en promedio 5.000 litros de leche durante 305 días en climas cálidos. Fotos: Felipe Argoty, magíster en Ciencias Agrarias de la Universidad Nacional de Colombia sede Palmira.

En Colombia la producción lechera afronta una crisis marcada por los altos costos tanto de los insumos importados utilizados por la industria como de los alimentos concentrados para el ganado, además de factores como la tendencia al bajo consumo en el mercado y el encarecimiento de las tierras en zonas tradicionales de ganadería, entre otros, situación que ha obligado a los productores a buscar nuevas alternativas que permitan mantener la rentabilidad del negocio y reducir las pérdidas.

Foto. La cría de terneras enfrenta tasas de mortalidad de hasta el 25 %

Cerca del 80 % de la producción de leche proviene de animales con composición genuina en su genética, escenario en el que resaltan las terneras Girolando, una raza que toma y supera lo mejor del cruzamiento entre la productividad de la Holstein y la rusticidad de la Gyr, lo que les permite adaptarse a altas temperaturas, ser más tolerantes a parásitos y poderse pastorear en condiciones adversas, características que las convierten en la mejor opción para climas tropicales como los de Tolima, Valle del Cauca, Magdalena Medio y los Llanos Orientales y la Costa Caribe, en donde han demostrado un rendimiento superior.

En la industria lechera la etapa más crítica es la cría de las terneras, ya que es cuando los animales dependen de una adecuada alimentación y cuidados especiales para asegurar su supervivencia y óptimo desarrollo. Además de ser costosa, esta fase se asocia con altos índices de mortalidad, en particular por problemas de nutrición.

Ante este problema, durante su Maestría en Ciencias Agrarias en la Universidad Nacional de Colombia (UNAL) Sede Palmira, el zootecnista Luis Felipe Argoty López evaluó mediante tres experimentos alternativas para mejorar la rentabilidad durante la cría, con dietas menos costosas pero con el aporte nutricional necesario para evitar problemas de crecimiento y desarrollo, clave en la crianza de reemplazo, cuando preparan a las terneras para que se conviertan en futuras vacas lecheras que renueven el hato y mantengan la productividad del sistema.

Foto. En Colombia cerca del 50 % de la producción de leche proviene de cruces de toros y cebús.

El Estudio

En la investigación se analizó el crecimiento y desarrollo ruminal (ingesta de alimento sólido) de 19 terneras Girolando F1 con edades entre 14 y 22 meses, en el corregimiento de Santa Rosa de Tapias, municipio de Guacarí (Valle del Cauca).

Para el trabajo se hicieron 3 grupos de animales con sendos tratamientos. A los del primer grupo (grupo control) se le suministraron 4 litros de leche al día, repartidas en dos tomas, y concentrado comercial; al segundo, 4 L de leche distribuidos en tres tomas, más consumo de alimento experimental; y al tercer grupo, 4 L de leche distribuidos en tres tomas, más consumo de alimento comercial. A todos los tratamientos se les suministró pasto pangola y agua a voluntad.

Sobre el alimento experimental, el investigador explica que “hicimos ajustes dentro de la proteína, la pusimos un poco más disponible dentro de la dieta de las terneras, usamos soya, maíz, algunos cereales, premezclas, un promotor de crecimiento ruminal y lo que utilizan todos los alimentos concentrados, porque el reto era hacer un concentrado experimental similar en composición al comercial, pero con algunas mejoras”.

Foto. El estudio se realizó con 19 terneras en el corregimiento de Santa Rosa de Tapias (Valle del Cauca)

También recolectó muestras de sangre cada 15 días, para analizar metabolitos como proteína, albúmina, globulinas, calcio, betahidroxibutirato (BHB) y cortisol. Así mismo evaluó parámetros biométricos como edad, peso, circunferencia, altura, ganancia de peso, consumo promedio y conversión alimenticia. Cada variable evaluada se analizó estadísticamente a través de un modelo mixto de medidas repetidas.

Aunque en la ganancia de peso los resultados no arrojaron diferencias significativas entre los tratamientos, entre muestreo sí las hubo y se evidenció que la edad de los animales influye en la concentración de proteínas en la sangre y que el BHB permite conocer indirectamente el desarrollo ruminal.

También se evidenció que “la edad de los animales influye en la concentración de proteínas en la sangre y que el BHB permite conocer indirectamente el desarrollo ruminal”.

Foto. Con la raza Girolando se puede obtener una producción lechera más competitiva y menos dependiente de razas europeas

El investigador destaca que, “este indicador sugiere que las terneras están desarrollando su rumen de forma óptima, lo cual es esencial para una digestión eficiente, y en última instancia para su futura capacidad de producir leche”.

También se registraron bajos niveles de cortisol en la sangre, una hormona que se libera en respuesta al estrés y puede afectar el crecimiento y la salud general del animal. Altos niveles de este indican que las terneras están experimentando estrés, lo que puede influir negativamente en su sistema inmunológico y reducir su capacidad de aprovechar nutrientes, afectando el desarrollo del rumen y la futura producción de leche.

“Si logramos que más productores opten por razas como la Girolando, tendríamos una producción lechera más competitiva y menos dependiente de razas europeas, cuya adaptación a nuestras condiciones es limitada”, anota el magíster.

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